âAnÃlise de fraÃÃes antigÃnicas da forma metacestÃdea de Taenia solium, obtidas pelo Triton X-114 e por cromatografia de afinidade, no diagnÃstico sorolÃgico da neurocisticercose humanaâ

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2008

RESUMO

A neurocisticercose (NC) causada pela forma metacestÃdea de Taenia solium freqÃentemente acomete o sistema nervoso central podendo ser confundida com outras sÃndromes neurolÃgicas. O diagnÃstico sorolÃgico da NC à de grande importÃncia na rotina laboratorial porque auxilia no diagnÃstico de pacientes que apresentam sinais clÃnicos e radiolÃgicos compatÃveis com esta doenÃa. A utilizaÃÃo de antÃgenos purificados tem permitido o desenvolvimento de testes mais sensÃveis e especÃficos, resultando em estudos soroepidemiolÃgicos e de triagem mais confiÃveis. Processos de purificaÃÃo antigÃnica utilizando Triton X-114 (TX-114) e cromatografia de afinidade consistem em tÃcnicas simples e de baixo custo. O objetivo deste estudo foi caracterizar e comparar diferentes fraÃÃes antigÃnicas da forma metacestÃdea de T. solium obtidos por separaÃÃo de fases usando TX-114 e cromatografia de afinidade para o sorodiagnÃstico da NC humana. Foram analisadas 132 amostras de soro, sendo 40 de pacientes com NC, 62 de pacientes com outras parasitoses e 30 de indivÃduos aparentemente saudÃveis. O extrato salino total (S) e o lÃquido de vesÃcula (LV) foram submetidos ao processo de fracionamento utilizando TX-114 para a obtenÃÃo das fraÃÃes antigÃnicas: detergente (DS e DLV, respectivamente) e aquosa (AS e ALV, respectivamente). O extrato S foi purificado em colunas de jacalina e N-acetilglicosamina, sendo apenas a fraÃÃo nÃo ligante de jacalina (FNL-J) submetida à coluna de concanavalina A (ConA) e fracionamento com TX-114. Todos antÃgenos foram analisados em SDS-PAGE 12% e corados pela prata para visualizaÃÃo das bandas antigÃnicas. As amostras de soro foram avaliadas para detecÃÃo de IgG pelo teste ELISA na diluiÃÃo de 1:200 e pelo immunoblotting na diluiÃÃo de 1:100. Sensibilidade, especificidade, eficiÃncia do diagnÃstico e Ãndice de Youden foram calculados para o teste ELISA. As sensibilidades e especificidades dos testes ELISA foram: 92,5% e 84,8% (S); 92,5% e 92,4% (DS); 67,5% e 70,6% (AS); 82,5% e 85,9% (LV); 77,5% e 72,8% (DLV); 80,0% e 80,4% (ALV); 85,0% e 84,8% (FNL-J); 92,5% e 93,5% (DFNL-J); 82,5% e 82,6% (AFNL-J), respectivamente. A eficiÃncia do diagnÃstico e o Ãndice de Youden dos testes ELISA foram: 87,1% e 0,77 (S); 92,4% e 0,85 (DS); 69,7% e 0,38 (AS); 84,8% e 0,68 (LV); 74,2% e 0,50 (DLV); 80,3% e 0,60 (ALV); 84,8% e 0,70 (FNL-J); 93,2% e 0,86 (DFNL-J); 82,6% e 0,65% (AFNL-J), respectivamente. No immunoblotting a banda de 70-50 kDa foi detectada em todas as amostras de soro de pacientes com NC para a fraÃÃo DFNL-J, enquanto nenhuma reatividade foi observada para esta fraÃÃo antigÃnica nas amostras de pacientes com outras parasitoses ou indivÃduos saudÃveis. Concluindo, a fraÃÃo DFNL-J foi mais sensÃvel e especÃfica que os outros extratos, sendo capaz de diferenciar pacientes com NC daqueles com outras parasitoses, particularmente nas infecÃÃes por Echinococcus granulosus.

ASSUNTO(S)

taenia solium triton x-114 taenia solium affinity chromatography imunologia aplicada cromatografia de afinidade diagnosis neurocisticercose triton x-114 neurocysticercosis taenia

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