Análise via PCR da presença de alelos do gene codificador da "sintase do fator de lacrimejação" dentro da população de cebola BRS Alfa São Francisco.
AUTOR(ES)
SANTOS, C. A. F.
FONTE
Horticultura Brasileira
DATA DE PUBLICAÇÃO
2011
RESUMO
Trabalho recente tem demonstrado que a lacrimejação provocada pela cebola não é um subproduto da ação da enzima aliinase e sim de uma enzima específica denominada "Iachrymatory factor synthase" ("sintase do fator de lacrimejação"). O presente trabalho teve como objetivo analisar via PCR a presença de alelos do gene codificador da "sintase do fator de lacrimejação" em bulbos da cultivar de cebola BRS Alfa São Francisco. O DNA genômico total foi isolado de plantas de cebola, sem seleção prévia para baixo teor de ácido pirúvico, segundo protocolo CTAB 2X. As reações de PCR foram realizadas em um volume final de 25 L (0,25 ~M de cada primer, 150 uM de cada dNTP, 1,5 mM de MgCb, 0,2 unidades da enzima DNA polimerase na solução tampão recomendada pelo fornecedor e 1 ,4 ~L do DNA total). Os seguintes primers foram sintetizados a partir da informação de sequência do cDNA da "sintase do fator de lacrimejação" (GenBank AB089203): prímer 1 (5-GCTMCGGAGCTCGAAMTG-3') e prímer 2 (5'-ACCCTCCACTATTTGCATGG-3'). A reação de PCR produziu amplicons monomórficos de aproximadamente 350 pares de bases (pb) para todos os indivíduos analisados. Este resultado indica que potenciais mutações do gene que produz a "sintase do fator de lacrimejação" não estejam situadas entre ou na região para onde os primers foram desenhados. Outra possibilidade é que todas as plantas avaliadas apresentem o mesmo alelo da "sintase do fator de lacrimejação". Trabalhos adicionais de síntese de novos primers e de análise de sequência dos amplicons produzidos de materiais contrastantes serão necessários para o desenvolvimento de prímers que possibilitem separar plantas com diferentes alelos do gene codificador do fator de lacrimejação. Esta nova geração de prímers seria extremamente útil em sistemas de seleção assistida visando o desenvolvimento de populações de cebola livre do "choro" combinada com teores elevados de compostos organosulfurados.
ASSUNTO(S)
cebola pcr Ácido pirúvico allium cepa
ACESSO AO ARTIGO
http://www.alice.cnptia.embrapa.br/handle/doc/157404Documentos Relacionados
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