Avaliação das condições experimentais para quantificação de LT produzida por linhagens de Escherichia coli enterotoxigênica isolada de humanos
AUTOR(ES)
Lasaro, Melissa Ang-Simões, Rodrigues, Juliana Falcão, Cabrera-Crespo, Joaquim, Sbrogio-Almeida, Maria Elisabete, Lasaro, Marcio de Oliveira, Ferreira, Luís Carlos Souza
FONTE
Brazilian Journal of Microbiology
DATA DE PUBLICAÇÃO
2007-09
RESUMO
A toxina termo-lábil (LT) é um fator de virulência associado à diarréia secretora não invasiva causada por linhagens de Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) em humanos ou animais domésticos. Diversos métodos de detecção de LT foram descritos na literatura, no entanto, a quantificação da toxina produzida por linhagens selvagens de ETEC é geralmente realizada por ensaio imunoenzimático com o gangliosídeo GM-1 (GM-1 ELISA). Neste estudo, conduzimos uma otimização experimental de um método alternativo de quantificação de LT, o ELISA de captura (cELISA). Análise detalhada de diluições apropriadas dos anticorpos LT específicos de captura e detecção melhorou significantemente a sensibilidade do método. Em adição, testes com diferentes técnicas de extração de LT indicaram que a ruptura das células por ultra-som, mas não o tratamento com polimixina B, clorofórmio ou Triton X-100, aumentou o rendimento da recuperação de LT. Além disto, os dados apresentados demonstram que o desempenho do método de extração de LT baseado no tratamento com polimixina B pode variar entre linhagens selvagens de ETEC.
ASSUNTO(S)
toxina termo-lábil lt etec celisa
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