Caracterização da enzima lisina cetoglutarato redutase (LKR)/ sacaropina desidrogenase (SDH) estudada em Phaseolus vulgaris

AUTOR(ES)

Suzana Telles da Cunha Lima

DATA DE PUBLICAÇÃO

1999

RESUMO

A via de degradação da lisina em plantas é catalizada pela enzima bifuncional lisina cetoglutarato redutase (LKR) / sacaropina desidrogenase (SOH). A LKR condensa lisina e a-cetoglutarato em sacaropina usando NAOPH como cofator e a SOH converte a sacaropina em a-aminoadipato-õ-semialdeido e ácido glutâmico, usando NAO+ como cofator. No presente trabalho foi demonstrado, em Phaseo/us vu/garis, a participação desta enzima no catabolismo de lisina. A atividade foi medida em diferentes tecidos desta espécie. O hipocótilo apresentou maior atividade específica em plantas estioladas, seguidas pela folha, vagem e raiz, com valores muito inferiores. Sementes e cotilédones não demonstraram presença mensurável da enzima. A LKRlSOH também foi encontrada em plântulas de feijão carioca 80 crescidas in vitro à partir de sementes cujo cotilédone foi retirado previamente. Usando o sistema in vitro, a resposta enzimática à adição de lisina no meio de crescimento foi testada, demonstrando que o substrato não causa alterações na atividade. A precipitação de proteínas do tecido de hipocótilo em concentrações crescentes de PEG 8000 revelou dois platõs de atividade, levantando a hipótese de haver duas isoformas da enzima. Essa possibilidade foi reforçada posteriormente devido à respostas diferentes à inibidores de fosfatase, os quais revelaram que a LKRlSOH em feijão é uma fosfoproteína, assim como já foi observado em outras plantas. A enzima do hipocótilo foi isolada por métodos cromatográficos, indicando ser um polipeptídeo bifuncional. No entanto, dependendo do procedimento de purificação, a enzima pode eluir como um monõmero de 94kOa, contendo apenas a atividade da SOH, ou como um dímero de 190kOa, com ambas atividades eluindo conjuntamente. As condições de iluminação durante o crescimento da planta revelaram exercer influência na atividade da LKRlSOH

ASSUNTO(S)

feijão enzimas aminoacidos

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