Caracterização e purificação de enzima amilolitica de Candida sp e sua aplicação

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DATA DE PUBLICAÇÃO

1994

RESUMO

A enzima amilolítica produzida por uma nova linhagem de levedura, classificada como Candida sp ATCC 90238, foi purificada e caracterizada. Este trabalho visou o aproveitamento de amido de milho para a produção de xarope de glicose e maltose. Estudou-se a sacarificação de amido, com a preparação bruta da enzima amilolítica de Candida sp, onde foi verificado a produção principalmente de glicose e maltose a temperaturas mais elevadas. A enzima foi purificada por fracionamento com sulfato de amônio, cromatografia em coluna de DEAE-Sephadex e CM-Celulose. A eletroforese da enzima purificada em gel de SDS-PAGE revelou uma única banda de proteína. O peso molecular foi estimado como 120.000 daltons. A enzima purificada foi caracterizada. Verificou-se que a enzima hidrolisa as ligações glicosídicas α-1,4 e α-1,6 de amido, o que tomou possível concluir que esta enzima é uma amiloglicosidase (E.C. 3.2.1.3., α-1,4 glucano glucanahidrolase), que entretanto, apresenta características diferentes da amiloglucosidase de Aspergillus niger e Rhizopus sp quanto à hidrólise da ligação glicosídica α-1,4 da maltose. A amiloglicosidase de Candida sp hidrolisa com menor eficiência a maltose e pode ser utilizada na produção de mistura de glicose e maltose. A enzima apresentou pH ótimo e temperatura ótima de 5,6 e 55° ¬60°C respectivamente. A combinação da amiloglicosidase de Candida sp com a pululanase de Klebsiella sp, resultou no aumento significativo da eficiência da hidrólise de amido de milho, para a produção de glicose e maltose

ASSUNTO(S)

enzimas amiloliticas - purificação

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