Centrifugação e osmocentrifugação em gradientes de densidade : aplicação ao fracionamento e caracterização de particulas e formação de uma nova classe de estruturas dissipativas

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

1989

RESUMO

Esta tese compreende quatro partes. 1. Descrição de uma nova metodologia para o fracionamento e determinação do diâmetro de partículas esféricas, que foi verificada usando-se látex de PS. Zonas de mistura de látexes poliméricos, na faixa de 0,1-0,5 mm, são colocadas sobre gradientes de densidade e centrifugadas, obtendo-se a separação de bandas de látex, das quais o polímero pode ser coletado e analisado posteriormente. As velocidades de migração das bandas nos experimentos de osmocentrifugação zonal são mais rápidas que em centrifugação zonal. 2. Estudo da agregação de partículas de látex de PS. O sobrenadante de um látex (0, 109 mm) coagulado irreversivelmente foj tracionado em seis bandas correspondentes a singletes, dubletes, até hexapletes. Usando um outro látex (0,460 mm) em diferentes concentrações de NaCl (abaixo e acima da concentração crítica de coagulação), a centrifugação zonal do látex revelou várias bandas, mesmo a [NaCl]=5 x 10 M. Esta técnica permite verificar a existência de espécies agregadas de látex e sua dependência com a concentração de eletrólito e tempo de coagulação. 3. Determinação do coeficiente de sedimentacão da eritrocruorina de Glossoscolex paulistus, uma hemoglobina gigante extracelular de anelídeo utilizando a metodologia desenvolvida na primeira parte da tese. Sobre o gradiente de densidade foram aplicadas amostras da proteína (50 ml cada; concentrações 2,5; 5,0; 6,25 e 12,5 mg/ml), centrifugadas a 4000 rpm, 4°C por 48 h. Foi obtido s20,w=58 S, que corresponde (para eritrocruorina) à massa molar de 323 x 10 Daltons. 4. Formação de estruturas dissipa - tivas em células dediálise. Em experimentos de osmocentrifugação zonal com amostras de alta concentração de eritrocruarina (125 mg,ml) hemoglobina, humana (92,4 mg/ml) é observada a formação de múltiplas bandas (estriamento) em toda a célula de diálise gerando um padrão periódico de concentração. É proposto um modelo para essas estruturas, baseado na formação de gradientes de concentração, nas bandas, seguido de convecção.

ASSUNTO(S)

particulas centrifugação separação (tecnologia)

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