Clonagem e análise do seqüenciamento de fragmentos de cpDNA de tomate: desenvolvimento de vetores espécie-específicos de transformação de cloroplastos
AUTOR(ES)
Berger, Irving Joseph, Carraro, Dirce Maria, Bock, Ralph, Azevedo, Ricardo Antunes, Carrer, Helaine
FONTE
Brazilian Journal of Plant Physiology
DATA DE PUBLICAÇÃO
2005-06
RESUMO
Visando o desenvolvimento de vetores homólogos de transformação de cloroplastos para tomate (Lycopersicon esculentum L.), fragmentos cloroplastidiais de tomate cv. IAC-Santa Clara foram clonados e analisados. Isolamento e clonagem de fragmentos PstI/SalI de cloroplastos de tomate deram origem aos plasmídios pIJB1 e pIJB2, contendo fragmentos de 8,6 pb e 6,4 pb respectivamente. Seqüenciamento e análise dos fragmentos revelaram que as seqüências apresentam de 93 a 100 % de identidade com os respectivos fragmentos em tabaco nas regiões codificadoras. Espaços intergênicos mostraram-se menos conservados, sugerindo que divergências evolutivas ocorreram principalmente em regiões não diretamente envolvidas na tradução. A diferença mais marcante encontrada está em um fragmento de 437 pb presente em tabaco na região intergênica entre os genes trnE e trnT, mas ausente no DNA cloroplastidial de tomate. Análise do padrão de restrição das seqüências cloroplastidiais apontou sítios únicos de restrição, sugerindo potencial uso dessas seqüências para a construção de vetores de transformação de cloroplastos. O recente sucesso na expressão de genes exógenos de interesse agronômico em cloroplastos de plantas sugere que essa tecnologia promete revolucionar o conceito e a aplicação da engenharia genética no melhoramento de plantas.
ASSUNTO(S)
lycopersicon esculentum nicotiana tabacum dna cloroplastidial fumo tomate transformação plastidial
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