Detecção de sequência 16S rRNA, específica de Borrelia, em RNA total extraído de Ixodes ricinus
AUTOR(ES)
Radulović, Ž., Milutinović, M., Tomanović, S., Mulenga, A.
FONTE
Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia
DATA DE PUBLICAÇÃO
2010-08
RESUMO
Para a detecção de espécies de Borrelia em carrapatos, desenvolveu-se a técnica da transcrição reversa, seguida da reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). A técnica baseou-se na amplificação de 552 bases de nucleotídeos de 16S rRNA, utilizando-se primers específicos de Borrelia. O RNA total extraído de amostras de carrapatos Ixodes ricinus foi usado como modelo. Verificou-se maior sensibilidade da RT-PCR, para a detecção de Borrelia, em comparação com a microscopia de campo escuro padrão. A especificidade da técnica foi confirmada por clonagem e sequenciamento dos 552 pares de base obtidos. A análise filogenética das sequências obtidas revelou que pertencem a B. lusitaniae e genospecies B. afzelii. A RT-PCR apresentada neste trabalho poderá ser muito útil como teste de triagem para detectar a presença do patógeno. Especialmente quando em investigações, é necessária a extração total de RNA de carrapatos.
ASSUNTO(S)
borrelia rt-pcr 16s rrna ixodes ricinus
Documentos Relacionados
- Coexistence of Ehrlichia phagocytophila and Borrelia burgdorferi sensu lato in Ixodes ricinus ticks from Italy as determined by 16S rRNA gene sequencing.
- Use of 16S rRNA, 23S rRNA, and gyrB Gene Sequence Analysis To Determine Phylogenetic Relationships of Bacillus cereus Group Microorganisms
- 16S rRNA oligonucleotide catalog data base.
- Identification of Vibrio anguillarum in fish by using partial 16S rRNA sequences and a specific 16S rRNA oligonucleotide probe.
- 16S rRNA Sequence Diversity in Mycobacterium celatum Strains Caused by Presence of Two Different Copies of 16S rRNA Gene