DeterminaÃÃo do efeito mitogÃnicos das lectinas de Cratylia mollis sobre linfÃcitos humanos utilizando um mÃtodo colorimÃtrico

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2002

RESUMO

Lectinas sao proteinas ou glicoproteinas que se ligam a carboidratos especificos. Algumas delas exibem atividade mitogenica sobre linfocitos humanos in vitro ou sao toxicas para estas celulas em cultura. Estas propriedades estao envolvidas com o sitio de ligacao a carboidratos. Neste trabalho foi determinada a atividade mitogenica das lectinas de Cratylia mollis (Cra-Sephadex e Cra Iso 1) sobre linfocitos humanos atraves de um ensaio colorimetrico que tem como principio a reducao do 3- (4,5-dimetil tiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazolio (MTT), atraves de uma enzima mitocondrial tetrazolio-succinato-desidrogenase, em MTT-formazan, um produto de coloracao azul escuro. As isoformas de C. mollis foram purificadas seguindo um protocolo estabelecido. Os linfocitos foram isolados do sangue periferico humano atraves de um gradiente de densidade dado pelo histopaque. Amostras de lectinas (Cra Sephadex, Cra-Iso 1, concanavalina A, Con-A e fitohemaglutinina, PHA) em variadas concentracoes, foram utilizadas para este ensaio. Posteriormente, foi realizado um ensaio de inibicao da atividade mitogenica utilizando o carboidrato metil ÆÂ-Dmanosideo. Os resultados obtidos foram expressos em indice de proliferacao (PI, do ingles: Proliferation Index), o qual representa a razao entre a absorbancia da proliferacao na presenca e na ausencia de lectina. Ambas as lectinas de C. mollis sao mitogenicas. Os efeitos destas lectinas sao comparaveis com aquelas lectinas mitogenicas, como con-A e PHA. A inibicao da proliferacao de linfocitos, com o carboidrato ligante, indicou que esse efeito mitogenico esta envolvido com sitio de ligacao da lectina

ASSUNTO(S)

mÃtodo colorimÃtrico bioquimica efeito mitogÃnico lectinas cratylia mollis

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