DETERMINAÇÃO E MODELAGEM DE EPÍTOPOS B ESPECÍFICOS PARA DENGUE 1 E DENGUE 2

AUTOR(ES)

FERNANDO BERTON ZANCHI

DATA DE PUBLICAÇÃO

2005

RESUMO

A padronização de testes sorológicos específicos do sorotipo do vírus da dengue (DENV) tem dois interesses principais: 1) interesse clínico, para predição e prevenção de formas graves das infecções por dengue; 2) importância epidemiológica para identificar vírus circulantes ou introduzidos em uma região. No presente trabalho utilizou-se métodos computacionais preditivos de caracterização físico-químicas de seqüências de aminoácidos presentes na proteína E (envelope) do vírus da dengue de sorotipo 1 (DENV-1) e 2 (DENV-2) para identificar peptídeos potencialmente capazes de constituir epítopos B lineares sorotipo-específicos. Os algorítmos preditivos usados, hidrofilicidade, probabilidade de uma sequência de aminoácidos estar na superfície, flexibilidade da cadeia principal dos aminoácidos, e do tempo de retenção em Cromatografia Líquida de Alta Performance HPLC e outros são acessíveis na World Wide Web (Internet), assim como os dados do Genbank sobre seqüências de nucleotídeos e aminoácidos da proteína E produzidas em vários laboratórios em diferentes regiões do globo. Outros testes computacionais foram utilizados para propor estruturas e localizações espaciais dos referidos peptídeos através da modelagem molecular da proteína E, principal indutora da resposta imune humoral dos DENV. Sete peptídeos correspondendo a estruturas lineares da proteína E, 3 relativas a dengue 1 e 4 relativas a dengue 2 foram identificadas como epítopos B sorotipo-específicos potenciais. Seis desses peptídeos foram sintetizados e utilizados para imunização de camundongos Balb/C. A resposta humoral dos soros humanos foi analisada por ELISA, usando como antígenos os peptídeos puros diferentes daquela usada para a imunização (KLH). Resultados preliminares indicam propriedades imunogênicas dos peptídeos sintéticos, em particular dos peptídeos número 3 da DENV-1 e número 3 da DENV-2. Anticorpos policlonais do soro dos camundongos dos respectivos peptídeos não mostraram reações cruzadas. A análise da especificidade de sorotipo dos anticorpos induzidos pela imunização está sendo continuada com a preparação de hibridomas para produção de anticorpos monoclonais a partir dos camundongos imunizados.

ASSUNTO(S)

dengue 2 epÍtopos b dengue 2 dengue 1 epÍtopos b dengue 1 biologia geral

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