Estudo da formação de biofilme em superfícies abióticas : influência de cátions divalentes e a ocorrência de determinantes de virulência em amostras clínicas de enterococcus faecalis

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2004

RESUMO

As espécies do gênero Enterococcus normalmente habitam o trato gastrintestinal de humanos e animais, mas também são encontrados no trato geniturinário e na cavidade oral de seres humanos, também nos vegetais, nas plantas, superfícies aquosas, solo e alimentos. Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium, principais espécies pertencentes a este gênero, podem provocar uma variedade de infecções bacterianas. Porém, a origem destas infecções ainda permanece incerta, assim como o mecanismo de patogenicidade destes microrganismos. Um outro grande problema relacionado com o aparecimento de infecções é a formação de biofilme que possibilita a aquisição de genes. A formação de biofilme confere proteção em relação ao sistema imune e resistência a certos antimicrobianos. Além disso, pode resultar no aparecimento de diversas infecções conseqüentes a colonização dos tecidos e a implantação de instrumentos médicos, como sondas, cateteres e próteses, que servem como substrato para o crescimento microbiano. Diante da importância e da participação deste gênero bacteriano nas diversas infecções nosocomiais, este trabalho procurou analisar numa coleção de amostras clínicas de E. faecalis, os diferentes determinantes de virulência. Além disso, averiguou-se uma possível correlação entre a presença de genes de virulência e formação de biofilme em diferentes superfícies abióticas (vidro e poliestireno). A habilidade em formar biofilme nas superfícies abióticas mostrou-se diferente para as amostras clínicas e dependente da superfície utilizada, ocorrendo uma maior formação em vidro que em poliestireno. Porém esta diferença não estava relacionada a origem destas amostras. Os fatores que possivelmente poderiam interferir com a formação de biofilme em vidro e em poliestireno foram avaliados. Entre estes fatores foram analisados a formação de biofilme nas diferentes fases da curva de crescimento, a participação de cátions divalentes, grau de hidrofobicidade e mecanismo de quorum sensing no processo de formação da camada de biofilme. As diferentes fases da curva de crescimento mostraram-se bastante influentes na formação de biofilme, onde a maior formação ocorreu no final da fase exponencial e início da fase estacionária, correspondendo ao período de 15 h. As participações de cátions divalentes (zinco, cálcio, cobre, magnésio e ferro) no processo de formação do biofilme em ambas as superfícies foram avaliadas. Os íons ferro e cobre influenciaram significativamente na formação da camada de biofilme. O íon ferro reduziu significativamente o número de células bacterianas aderidas a ambas as superfícies, enquanto que o íon cobre depletou a formação de biofilme, sendo que essa influência apresentou-se dependente das concentrações de ambos os íons. Quanto ao grau de hidrofobicidade, este se mostrou dependente do tempo de análise, pois em 8 h (fase exponencial) ocorreu uma alteração significativa da hidrofobicidade, onde a freqüência das amostras hidrofóbicas foi maior. O mecanismo de quorum sensing não foi observado no tempo utilizado durante a realização do experimento (15 h). Os nove determinantes de virulência analisados (cylMBA, efaA, enlA, eep, esp, aggA e gelE) para as 95 amostras clínicas de E. faecalis apresentaram-se amplamente distribuídos, sendo que a grande maioria não apresentou associação com a origem das amostras. Quanto a possível associação entre determinantes de virulência e formação de biofilme em vidro e em poliestireno, apenas cylMA, enlA, efaA, aggA, gelE e eep mostraram-se associados à superfície utilizada e a classificação das amostras quanto à capacidade de formar biofilme. Os isolados clínicos de E. faecalis aderiram mais fortemente à superfície de vidro em relação ao poliestireno e essa formação mostrou-se dependente do tempo de cultivo utilizado na análise, da concentração dos íons ferro e cobre, além da hidrofobicidade. Quanto aos determinantes analisados, estes se mostraram amplamente distribuídos entre as amostras e associados com a formação de biofilme tanto em vidro quanto em poliestireno.

ASSUNTO(S)

virulence ( microbiology) microbiology microbiologia virulência (microbiologia)

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