Expressão do fator de transcrição HIF - 1 alfa em condrocitos humanos cultivados em condições normais de oxigenio / Expression of hypoxia inducion factor 1 alfa in human chondrocytes cultivated in normoxia

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2006

RESUMO

Introdução: Os condrócitos da cartilagem articular vivem em um ambiente com baixa concentração de oxigênio. Nestas condições, a proteína do fator induzido por hipóxia (HIF-1?) mantém-se estável e ativa genes que são fundamentais na homeostase do oxigênio. A expressão do HIF-1? aumenta, em joelhos com osteoartrite (OA), principalmente nas áreas mais afetadas pela degeneração. Os condrócitos são capazes de produzir mediadores inflamatórios, como a interleucina-1 (IL-1) e o fator de necrose tumoral ? (TNF-?), que estimulam a produção de prostaglandinas, metaloproteinases e óxido nítrico e relacionam-se com o início e com a progressão da osteoartrite. Os antiinflamatórios são drogas freqüentemente utilizadas no tratamento sintomático da OA. Material e Método: condrócitos humanos de joelhos osteoartríticos cultivados em suspensão e em condições normais de oxigênio foram divididos em quatro grupos: 1) controle, 2) estimulados com IL-1 ou TNF-?, 3) estimulados com meloxicam ou parecoxibe e 4) estimulados com meloxicam ou parecoxibe associados a IL-1 ou TNF-?. Os grupos foram submetidos à extração de RNA (ácido ribonucléico) e de proteína nuclear. O RNA foi convertido em cDNA, sendo então realizada a reação de PCR em tempo real para verificar a expressão do HIF-1?. As proteínas nucleares foram extraídas, quantificadas e analisadas pela técnica de Western Blotting. Resultados: Foi detectada a expressão de HIF-1? e cDNA de HIF-1? em todos os grupos de condrócitos cultivados em suspensão em tensões normais de oxigênio, não havendo diferenças significativas entre os grupos. Discussão: a meia-vida do HIF-1? é extremamente curta em normóxia e marcadamente prolongada em hipóxia, por isso muitos pesquisadores acreditam não ser possível a detecção da proteína do HIF-1? em condrócitos cultivados em condições normais de oxigênio. Neste estudo foi possível constatar a expressão do HIF-1? em normóxia, possivelmente devido ao modelo de cultura utilizado. O estímulo com IL-1, TNF-? e inibidores da COX-2 não alterou a expressão de HIF-1?. Condrócitos oriundos de articulações osteoartríticas avançadas poderiam apresentar resistência à ação das citocinas

ASSUNTO(S)

chondrocytes articular cartilage condrocitos interleucina-1 cartilagem articular

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