Fusão asparaginase II-GFP como ferramenta para estudo da via secretora de enzima sobre depleção por nitrogênio
AUTOR(ES)
Sotero-Martins, Adriana, Bon, Elba Pinto da Silva, Carvajal, Elvira
FONTE
Brazilian Journal of Microbiology
DATA DE PUBLICAÇÃO
2003-12
RESUMO
A produção de asparaginase II de Saccharomyces cerevisiae é regulada por nitrogênio e pode ser utilizada como um sistema modelo para estudar outras proteínas secretadas, em leveduras. A proteína "green fluorescent protein" (GFP) de Aequorea victoria foi fusionada à porção carboxi-terminal de Asp3p por integração genômica da sequência de GFP ao locus ASP3. Determinaram-se os níveis de atividade de asparaginase II, mRNA ASP3, mRNA ASP3-GFP e de fluorescência para GFP. A depleção para nitrogênio, em células portadoras do gene quimérico ASP3-GFP, fez aumentar a fluorescência, assim como a expressão de ASP3. Demonstramos que Asp3-GFPp pode ser utilizada para estudar a secreção de asparaginase II em células submetidas à privação de nitrogênio in vivo.
ASSUNTO(S)
asparaginase ii regulação por nitrogênio saccharomyces cerevisiae integração genômica proteína de fluorescência verde
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