High quality DNA from human papillomavirus (HPV) for PCR/RFLPs

AUTOR(ES)

Wanderlei-Silva, Denise, Nobre, Mariana, Gonzaga, Rosa Silva, Viana, Luciana Silva, Ramalho Neto, Eduardo

FONTE

Brazilian Archives of Biology and Technology

DATA DE PUBLICAÇÃO

2005-01

RESUMO

A detecção de DNA em amostras clínicas visando um diagnóstico mais seguro vem se tornando uma prática comum em laboratórios de análise clínica. Metodologias que objetivem o isolamento de DNA de alto peso molecular de HPV podem levar a uma amplificação precisa e diagnose precoce do DNA do vírus por PCR (reação de polimerase em cadeia). Nós descrevemos um método para o isolamento do DNA do vírus do papiloma humano de amostras cervicais utilizando o detergente guanidina (solução DNAzol). O método foi rápido, não-tóxico e eficiente. Uma banda de DNA de 450 pb correspondente à região tardia (L1) do genoma viral foi detectada por PCR, mostrando que a extração com DNAzol gerou quantidade suficiente de DNA para análise. O padrão eletroforético, após digestão com endonucleases de restrição (RFLPs/PCR), revelou predominância de HPV 16 e HPV-33 nas amostras no Estado de Alagoas, Brasil.

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