Imobilização de enzimas no suporte crisotila

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DATA DE PUBLICAÇÃO

1995

RESUMO

A imobilização de enzimas em suportes apropriados se constitui em área de interesse enquanto pode significar melhoria de processos e barateamento de custos. O suporte ideal deve adsorver irreversivelmente a enzima, sem afetar sua atividade e sem interferir na reação enzimática. Neste trabalho imobilizou-se urease e invertase sobre crisotila. Crisotila, um mineral de hábito fibroso e superfície hidroxilada, possui boas propriedades de retenção. A urease é bastante utilizada em clínica/química. A invertase é importante na indústria de alimentos. Foram determinados: isotermas de adsorção a baixa cobertura, retenção, atividade catalítica e estabilidade das enzimas suportadas. A urease, tanto em água deionizada quanto em tampão tris/HCI pH = 8, atinge o equilíbrio de adsorção sobre crisotila em cerca de 1 hora. A quantidade adsorvida depende pouco da massa de crisotila. Não se obteve saturação. As quantidades adsorvidas não dependem do meio. A invertase obtida pela autólise do fermento Fleischmann, atinge o equilíbrio de adsorção em cerca de 5 minutos. A quantidade adsorvida independe da massa de crisotila. Tanto urease quanto invertase adsorvem irreversivelmente sobre o suporte. A urease não dessorve e a invertase dessorve muito pouco. Ambas enzimas apresentam atividade após suportadas e mesmo depois de estocadas, embora esta atividade seja bem menor que a das enzimas livres. A atividade específica de urease suportada varia de 1 a 4% com relação à enzima livre, dependendo do meio e do pré-tratamento do suporte; valores típicos de atividade são da ordem de 66 a 198 mmol amônia/dia para 3,0 mg de urease suportadas em 1 g de crisotila. A atividade específica de invertase imobilizada varia de 19 a 35% com relação à da enzima livre no extrato; valor típico de atividade é da ordem de 8,7 mmol glicose/min para 0,73 mg proteína adsorvida em 0,25 g de crisotila. Observa-se redução da atividade de ambas as enzimas suportadas tanto na reutilização quanto após estocagem; urease/crisotila perde cerca de 80% da sua atividade após 7 dias de estocagem. Ao todo, a adsorção das enzimas é rápida, eficiente e irreversível, nas quantidades ensaiadas. A urease/crisotila tem atividade bastante reduzida comparada à apresentada em outros suportes. Invertase/crisotila apresenta atividade comparável à obtida nos melhores suportes.

ASSUNTO(S)

enzimas

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