Obtenção de mutantes deficientes no acúmulo de PHA e construção de linhagens recombinantes para o controle da composição monomérica / Mutants deficient on polyhydroxyalkanoate (PHA) accumulation and construction of recombinants to control monomer composition on PHA
AUTOR(ES)
Rogério de Sousa Gomes
DATA DE PUBLICAÇÃO
2010
RESUMO
Pseudomonas putida produz PHA de cadeia média (PHAMCL) a partir de carboidratos e óleos vegetais. Genes de biossíntese de P3HB (poli-3-hidroxibutirato) de Ralstonia eutropha foram inseridos em P. putida IPT046 selvagem e mutantes PHA-. A expressão de phaC, codificador da PHA sintase, permitiu o acumulo de PHA com alto teor de 3HB, indicando que P. putida possui enzimas geradoras de 3HB. A expressão de phaB mostrou que seu produto canaliza 3HB e 3-hidroxihexanoato (3HHx) da β-oxidação para a PHA sintase. Ao expressar phaC em IPT461, afetado na PHA sintase, 30% de P3HB-co-3HHx-co-3HO foram produzidos a partir de carboidratos, mostrando que há vias metabólicas eficientes para suprir 3HAMCL, que são incorporados pela PHA sintase de R. eutropha. Usando transposon mini-Tn5, obtiveram-se mutantes deficientes na biossíntese de PHA a partir de glicose ou glicose e octanoato. Não se detectaram mutantes exclusivamente deficientes no acúmulo de PHA a partir de octanoato, indicando que diferentes produtos gênicos canalizam intermediários da β-oxidação para a síntese de PHA.
ASSUNTO(S)
ketoacyl-coa reductase pseudomonas pha synthase polímeros biodegradáveis mini-tn5 transposon transposon mini-tn5 polihidroxialcanoatos 3-cetoacil-coa redutase polyhydroxi alkanoates pha sintase biodegradable polymers pseudomonas
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