Produção e caracterização de quitooligossacarídeos produzidos pelo fungo Metarhizium anisopliae e avaliação da citotoxicidade em células tumorais

AUTOR(ES)

Cristiane Fernandes de Assis

DATA DE PUBLICAÇÃO

2010

RESUMO

A quitosana é um polímero natural, biodegradável, não tóxico e de alta massa molecular obtido a partir de animais marinhos, insetos e microrganismos. Os oligômeros de glicosamina (GlcN) e N-acetilglicosamina (GlcNAc) têm atividades biológicas interessantes, incluindo efeitos antitumorais, atividade antimicrobiana, antioxidante entre outras. A alternativa proposta por este trabalho foi estudar a viabilidade de produção de quitooligossacarídeos utilizando um extrato bruto de enzimas produzidas pelo fungo Metarhizium anisopliae. A hidrólise da quitosana foi realizada em diferentes tempos, de 10 a 60 minutos para a produção de quitooligossacarídeos e a detecção e quantificação foi realizado pela Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. A avaliação da citotoxicidade dos oligômeros de quitosana foi realizada em células tumorais (HepG2 e HeLa) e não tumoral (3T3). As células foram tratadas durante 72 horas com os oligômeros e a viabilidade celular foi feita usando o método do MTT. A produção de oligômeros de quitosana teve maiores rendimentos durante 10 minutos de hidrólise, os pentâmeros apresentaram concentração de 0,15 mg/mL, porém os hexâmeros, que apresentam maior interesse pelas suas propriedades biológicas, só foram detectados com 30 minutos de hidrólise apresentando uma concentração de 0,004 mg/mL. Um estudo visando avaliar as atividades biológicas dos QCOS entre elas a citotoxicidade em células tumorais e normais e vários testes de atividade antioxidante in vitro entre oligômeros puros de quitosana e a mistura dos oligômeros produzidos pelo extrato bruto enzimático foi realizado. A glicosamina foi o composto com a maior toxicidade dentre os oligômeros puros, apresentando valores de IC50 0,30; 0,49; 0,44 mg/mL para células HepG2, HeLa e 3T3, respectivamente. O seqüestro do ânion superóxido foi a principal atividade antioxidante mostrada pelos QCOS. Sendo que essa atividade também foi dependende da composição dos hidrolisados de quitosana. Os oligômeros produzidos por hidrólise durante 20 minutos foram analisados quanto à capacidade de inibir células tumorais mostrando inibição da proliferação apenas nas células HeLa, não apresentando nenhum efeito em células HepG2 e células de fibroblastos (3T3)

ASSUNTO(S)

quitooligossacarídeos quitosanases metarhizium anisopliae células tumorais citotoxicidade antioxidantes outros chittoligosaccharides chitosanases metarhizium anisopliae tumoral cells cytotoxicity antioxidant

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