Production and characterization of vegetal and microbiana B-glicosidase and its application for conversion of isoflavonas glicosiladas in isoflavonas agliconas . / Produção e caracterização de [beta]-glicosidase vegetal e microbiana e sua aplicação para conversão de isoflavonas glicosiladas em isoflavonas agliconas.

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2003

RESUMO

Há evidências de que o consumo de soja beneficia a saúde contribuindo para a prevenção de doenças crônicas devido as isoflavonas presentes nessa leguminosa. Essas isoflavonas têm sido intensamente estudadas devido suas propriedades biológicas, tais como: atividade estrogênica e anti-estrogênica, anti-carcinogênica, antioxidante, antifúngica e anti-hemolítica. A soja possui três tipos de isoflavonas agliconas: daidzeína, genisteína e gliciteína. As mesmas isoflavonas quando glicosiladas são chamadas daidzina, genistina e glicitina. A enzima b-glicosidase é capaz de transformar isoflavonas glicosiladas em agliconas. Há evidências que as isoflavonas glicosiladas não são absorvidas pelo intestino somente as agliconas são absorvidas. O presente trabalho teve como objetivo estudar b-glicosidases de fungos filamentosos e b-glicosidase de leguminosas. A partir da extração enzimática foram selecionadas as de maior atividade enzimática, uma enzima de feijão fava (Phaseolus lunatus) com 0,71U/mL e outra enzima de Aspergillus niger com 0,77U/mL. Foi então feita caracterização bioquímica dos extratos brutos enzimáticos. O extrato bruto de feijão fava apresentou pH e temperatura ótimos a pH 5,5 e 60°C, respectivamente. Mostrou-se estável em uma faixa ampla de pH entre 5,0 a 9,0 e temperatura de 40°C a 55°C. O extrato bruto de Aspergillus niger teve pH e temperatura ótimos a pH 5,0 e 60°C, respectivamente. Mostrou-se estável a uma temperatura de 40°C a 55°C e em pH de 4,0 a 9,0. As enzimas, vegetal e microbiana, foram parcialmente purificadas. A b-glicosidase de feijão fava foi purificada 4 vezes em coluna CM-Sepharose com 77,05% de recuperação e atividade específica de 0,18U/mg de proteína. Apresentando 5 bandas na eletroforese SDS-PAGE. A b-glicosidade de A. niger foi purificada 14 vezes em coluna CM-Sephadex C-50 com 2,2%de recuperaçãoe atividade específica de 17U/mg de proteína e apresentou 4 bandas na eletroforese. O estudo da aplicação das enzimas variando o substrato e sua concentração, tempo de reação, tipo e quantidade da enzima para a conversão das isoflavonas glicosiladas em agliconas mostrou-se que todos esses fatores podem influenciar a conversão. Pode-se concluir que enzimas de Phaseolus lunatus e Aspergillus niger convertem isoflavonas glicosiladas (daidzina e genistina) em isoflavonas agliconas (daidzeína e genisteína).

ASSUNTO(S)

feijão phaseolus lunatus aspergillus niger isoflavonas aspergillus niger beans broadbean isoflavonas beta-glicosidade

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