Quantification of autoantibodies to annexin V in plasma by an "in house" sandwich ELISA

AUTOR(ES)

Pelusa, Héctor F., Valdés, María de los Ángeles, Daniele, Stella M., Almará, Adriana M., Svetaz, María J., Bearzotti, Mariela, Paparella, Cecilia V., Bouvet, Beatriz R., Ghersevich, Sergio A., Arriaga, Sandra M.

FONTE

Journal of the Brazilian Chemical Society

DATA DE PUBLICAÇÃO

2012-03

RESUMO

Foi desenvolvido e validado um ELISA tipo sanduíche "in house" para a quantificação de anticorpos (Ac) anti-anexina V em plasma. Os parâmetros de validação estudados foram: (i) precisão, expressado como coeficiente de variação (CV) inter- e intra-ensaio, (ii) exatidão, expressado como porcentagem de desvio entre o valor obtido e o valor real, (iii) limite de detecção (LOD), avaliado a partir do branco de reagentes e (iv) robusteza, obtida através da introdução propositada de pequenas variações em diferentes parâmetros. Além disso, a técnica "in house" foi comparada com um método comercial. Encontrou-se que ambos CV foram < 20%, a exatidão foi de 100 ± 20%, o limite de detecção foi menor que 1 U mL-1 e as pequenas variações na técnica não produziram variações significativas nos resultados. A comparação com o método comercial mostrou uma correlação aceitável. Concluiu-se que o método desenvolvido cumpre satisfatoriamente com os parâmetros de padronização e validação para imuno-análise.

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