SeleÃÃo de Streptomyces spp produtores de inibidores de β-lactamases

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2004

RESUMO

Com a utilizaÃÃo clÃnica de agentes antimicrobianos comeÃaram a surgir bactÃrias resistentes a diversos antibiÃticos, entre os quais, se destacam os β-lactÃmicos. A hidrÃlise do anel β-lactÃmico pelas enzimas β-lactamases à o mecanismo de resistÃncia bacteriana mais bem documentado. A obtenÃÃo de Streptomyces produtores de inibidores de tais enzimas constitui uma importante estratÃgia para contornar o problema da resistÃncia bacteriana, garantindo a continuidade da terapia antimicrobiana com os β-lactÃmicos. Com este objetivo, 19 linhagens de Streptomyces spp, pertencentes a ColeÃÃo de Microrganismos do Departamento de AntibiÃticos da UFPE (DAUFPE), isoladas de solos e preservadas em Ãleo mineral foram testadas quanto a capacidade de inibir a aÃÃo de β-lactamases produzidas por Klebsiella aerogenes ATCC 15380. As 19 linhagens foram purificadas utilizando-se os meios ISP-1 e TSB e submetidas à seleÃÃo primÃria pelos mÃtodos de difusÃo em Ãgar, utilizando bloco de gelose e cultivo em meio sÃlido nos meios CAA e ISP-2. No meio CAA, 15% das linhagens formaram halo de inibiÃÃo, com 10 a 12 mm de diÃmetro e 10% formaram halos maiores que 20 mm de diÃmetro. No meio ISP - 2,5% das linhagens formaram halo de 12 mm de diÃmetro e 11% halos de 17 mm de diÃmetro. A partir destes ensaios, cinco linhagens (DAUFPE 3036, DAUFPE 3060, DAUFPE 3094 DAUFPE 3098 e DAUFPE 3133) que formaram os maiores halos de inibiÃÃo, foram selecionadas para ensaio em meio lÃquido usando meios de cultura sintÃticos ou quimicamente definidos e complexos. As fermentaÃÃes foram realizadas a 300C e 200rpm durante 96 horas. As amostras retiradas em intervalo de tempo prÃ-definido foram submetidas à centrifugaÃÃo a 11000 rpm por 5 minutos, para a separaÃÃo do lÃquido metabÃlico, o qual foi submetido a determinaÃÃo de pH, atividade antimicrobiana e Ãcido clavulÃnico, sendo este um potente inibidor de β-lactamases. Observou-se que o melhor meio para produÃÃo de inibidor de β-lactamase foi o MPE modificado, em que todas as linhagens apresentaram atividade antimicrobiana contra Klebsiella aerogenes ATCC 15380. Com relaÃÃo à produÃÃo de Ãcido clavulÃnico, trÃs linhagens (DAUFPE 3036, DAUFPE 3060 e DAUFPE 3094) apresentaram resultado positivo em dois meios de cultura (MPE modificado e meio com glicerol), enquanto que as duas linhagens restantes (DAUFPE 3098 e DAUFPE 3133) produziram outros inibidores

ASSUNTO(S)

resistÃncia bacteriana -lactamases) streptomyces clauvuligerus -lactamases (Ãcido clavulÃnico) meios de cultura experimento fermentaÃÃo inibidores de β enzimas (β quimica dos produtos naturais

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