Separação, quantificação e caracterização dos componentes da leghemoglobina de Styzolobium atterrimum (mucuna preta) em diferentes estagios de desenvolvimento

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

1990

RESUMO

As leghemoglobinas (legHb) sintetizadas nos nódulos de raiz de plantas leguminosas durante a fixação simbiótica de N2, são semelhantes as mioglobinas animais quanto à estrutura e função. A síntese da legHb nos nódulos é produto da expressão de diferentes genes e os tipos moleculares em uma mesma espécie podem ser identlficados por cromatografia de troca iônica. A legHb de mucuna preta, foi purificada por precipitação do extrato de tecido nodular com sulfato de amônio entre 55% e 80% de saturação; passagem em DEAE-celulose ph 7,0 para retenção dos pigmentos; oxidação com ferricianeto de potássio e passagem em G-25 para eliminação do oxidante. A legHb total, na forma oxidada e complexada com acetato foi aplicada em DEAE-celulose equilibrada com tampão acetato pH 5,2. Os componentes sintetizados nos diferentes estádios foram separados pela aplicação de gradiente linear de acetato. O conteúdo de legHb total no estádio vegetativo foi de 1,23 mg/g de nódulo; na floração foi 1,O1 mg/g de nódulo e na frutificação 0,35 mg/g de nódulo. O perfil cromatográfico no estádio vegetativo e na floração é o mesmo e foram identificados 5 componentes. Na frutificação foram encontrados apenas 4 componentes. A redução na síntese de legHb com a idade da planta não é seguida de uma redução proporcional na quantidade relatlva dos componentes. Os componentes mais diferenclados pelo comportamento cromatográfico foram caracterizados quanto ao peso molecular, propriedades espectrais, afinidade pelo anion acetato e pK da transição ácida alcalina.

ASSUNTO(S)

leguminosas - desenvolvimento plantas - desenvolvimento

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