Transformação de Xanthomonas axonopodis pv. citri através de eletroporação

AUTOR(ES)
FONTE

Fitopatologia Brasileira

DATA DE PUBLICAÇÃO

2005-06

RESUMO

É descrito o uso da eletroporação para a transformação de Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac), a agente causal do cancro cítrico, e a avaliação da metodologia para esta espécie sob diferentes parâmetros elétricos. A bactéria utilizada neste estudo (Xac 306) foi a mesma isolado usado recentemente no seqüenciamento completo do organismo. Aqui, é documentado o uso do plasmídeo pUFR047 (gentamicina r) capaz de replicar em células de Xac. Após a preparação e re-suspensão das células competentes de Xac na densidade de ~4 x 10(10) ufc/ml, em 10% glycerol, e a adição do plasmídeo replicativo, um pulso elétrico foi aplicado a cada tratamento. A seleção dos transformantes mostrou uma alta eficiência de transformação (1,1 x 10(6) transformantes/mig DNA), o que indica uma efetiva e inversa combinação entre a resistência elétrica (50 W) e a capacitância (50 µF) para esta espécie, com uma descarga elétrica de 12.5 kV.cm-1 e duração de pulso de 2,7 ms. Além da descrição de método de eletroporação do isolado Xac 306, este estudo fornece informação adicional para o uso da técnica em estudos para a produção de mutantes da espécie.

ASSUNTO(S)

cancro cítrico mutante citrus spp

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