Visualização de fragmento de PCR do gene codificador da "sintase do fator de lacrimejação" em cebola em géis de poliacrilamida e agarose.

AUTOR(ES)

LIMA, R. S. N. de

FONTE

Horticultura Brasileira

DATA DE PUBLICAÇÃO

2011

RESUMO

Este trabalho teve como objetivo visualizar em géis de agarose comum 1,5% e poliacrilamida 5,7% o fragmento do gene codificador da ?sintase do fator de lacrimejação - SFL?, amplificado via PCR, em plantas de 15 genótipos de cebola e uma de Allium tuberosum. DNA genômico total foi extraído pelo protocolo CTAB 2x. As reações de PCR foram realizadas em volume final de 25 µL (0,25 µM de cada primer, solução de 4 x 150 µM de dNTPs, 1,5 mM de MgCl2, 0,2 U de Taq DNA polimerase e 30 ng do DNA). Os primers foram sintetizados a partir da seqüência do cDNA da SFL (GenBank AB089203). No gel de agarose foram visualizados fragmentos de, aproximadamente, 330 pb para todos os genótipos analisados, exceto A. tuberosum. No gel de poliacrilamida foram observados dois fragmentos: um de grande intensidade, de, aproximadamente, 330 pb, em todos os genótipos, exceto em ?IPA 10?, ?Alfa São Francisco? com 0,85 µmol de ácido pirúvico/mL e A. tuberosum, que apresentaram fragmento de menor intensidade, e outro de, aproximadamente, 260 pb em todos os genótipos, exceto, na ?IPA 10?, ?Alfa São Francisco? com 0,85 µmol de ácido pirúvico/mL e A. tuberosum. A intensidade do fragmento de 260 pb foi também menor em ?IPA 12? e na ?IPA 8?. Os resultados em gel de poliacrilamida sugerem que os genótipos que não apresentaram o segundo fragmento são homozigotos e os demais heterozigotos, sendo necessários novos estudos para que a amplificação via PCR do SFL seja ser útil em programas de melhoramento de cebola para ausência da lacrimejação.

ASSUNTO(S)

cebola allium cepa genótipo Ácido pirúvico

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